5）關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗。（按控制面牌上真空泵鍵，按一下開，再按一下關(guān)）

　　6）操作室內(nèi)*次置換（氮氣置換）：

　?。?）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一個插入塑料袋。

　　（2）接通氮氣進氣路，打開操作室氮氣控制閥，使兩只塑料袋充足氮氣后，關(guān)閉電磁閥，然后扎緊袋口。

　　（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

　　（4）把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸的放于操作室內(nèi)，至全部防除。

　　7）操作室第二次置換（氮氣置換）重復(fù)一次沖氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。

　　8）操作室第三次置換（混合氣體置換）(混合氣體配比為H2 1/85%H2 1/10%H2 1/10%CO2/15%）

　?。?）調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進氣，沖氣時取樣室先抽真空，并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。

　?。?）混合氣充滿塑料袋后，關(guān)閉電磁閥，并打開混合氣限流閥，使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計、調(diào)整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。

　?。?）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。

　?。?）通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)

　　9）操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點潔凈水，1-2小時后，觀察其變色情況，反應(yīng)部分深藍色變?yōu)闇\藍為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。

　　10）紫外線滅菌燈，室內(nèi)進行滅菌處理，滅菌時間自定。

　　菌種的置入和培養(yǎng)

　　1）檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。

　　2）打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們。

　　3）取樣室充氮置換三次過程，先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa)以上停，然后打開取樣室氧氣閥進氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。

　　4）如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。

　　5）取樣室外門開啟、關(guān)緊后，再抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗。

　　6）厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件

　?。?）每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察，如不能正常就必須重新?lián)Q氣。

　?。?）要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結(jié)合通過催化吸收，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。

　　（3）.連續(xù)培養(yǎng)運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。（換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi)，干燥2－3小時可使其復(fù)原）

　　7）接種棒滅菌器的應(yīng)用：

　?。?）隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）。

　?。?）熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。

　　8）操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。

　　厭氧培養(yǎng)箱注意事項：

　　1．儀表盡可能地安裝于空氣清靜，溫度變化較小的地方。

　　2．開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。

　　3．培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境后放入。

　　4．如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。（超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）。

　　5．經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。

　　6．調(diào)換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體。

　　7．真空泵按要求使用，定期檢查加油。

　　8．停止使用，關(guān)閉總電源鍵，及設(shè)備后部的電源開關(guān)。